Содержание
- Лучший просмотр
- Идентификация и классификация
- Обнаружение осуществимости
- Идентификация клеточных структур
Микробиологи изучают характеристики микроорганизмов, таких как водоросли, бактерии, простейшие, грибы и вирусы, с помощью микроскопа. Хотя некоторые организмы, такие как простейшие и дрожжевые клетки, легко увидеть на предметных стеклах, бактериальные клетки требуют окрашивания. Ученые разработали несколько методов, таких как метод окрашивания по Граму, кислотостойкое окрашивание и флуоресцентное окрашивание, чтобы улучшить визуализацию бактериальных клеток и клеточных структур. Используя такие методы окрашивания, можно определить структурные характеристики, которые помогают классифицировать бактерии.
Лучший просмотр
Бактериальные организмы настолько малы, что большинство из них можно увидеть только под микроскопом с увеличением в 1000 раз. Однако простое увеличение размера не обеспечивает достаточной степени ясности, поэтому бактерии должны быть окрашены перед наблюдением, чтобы обеспечить ясность, необходимую для визуализации.
Идентификация и классификация
Окрашивание бактерий для различения типов бактерий известно как дифференциальное окрашивание. Окраска по Граму - это дифференциальная окраска, позволяющая различать бактерии в зависимости от содержимого клеточной стенки. В этом методе бактериальные клетки реагируют с красителем кристаллического фиолетового, превращаясь в фиолетовый. Из-за добавления отбеливающего вещества некоторые бактериальные клетки теряют свой цвет, а другие - нет. При добавлении красителя сафранин обесцвеченные клетки становятся красными, в то время как бактериальные клетки, которые не теряют цвет, остаются фиолетовыми. Клетки, которые становятся красными, называются грамотрицательными организмами, а клетки, которые не становятся красными, классифицируются как грамположительные. Техника окрашивания по Граму обеспечивает быстрый метод первоначальной идентификации бактерий, участвующих в инфекциях. Точно так же процесс кислотостойкого окрашивания помогает специфически идентифицировать организмы, принадлежащие к классу бактерий, называемых микобактериями, например Mycobacterium tuberculosis.
Обнаружение осуществимости
В образцах бактериальных культур часто важно обнаружить присутствие живых бактериальных клеток. Такие методы, как флуоресцентное окрашивание, помогают определить, жизнеспособны ли культивируемые клетки. Живые бактерии обладают способностью превращать тетразолий-5-циано-2,3-дитолилхлорид (СТС) в краситель с красной флуоресценцией. Следовательно, когда культуры, окрашенные СТС, излучают эти флуоресценции, это указывает на присутствие жизнеспособных бактерий. Иодид пропидия - это краситель, который действует только на неживые клетки с поврежденными мембранами и поэтому полезен для идентификации мертвых бактериальных клеток.
Идентификация клеточных структур
Окрашивание обеспечивает четкую визуализацию различных клеточных структур. Например, метод окрашивания по Фельгену позволяет идентифицировать ядро внутри бактериальных клеток, в то время как окрашивание по Альберту полезно для визуализации метахроматических гранул. Аналогичным образом, метод импрегнации серебром позволяет идентифицировать спирохеты. Жгутики легко заметить, если они окрашены в окраску Рю. Окрашивание малахитовым зеленым помогает идентифицировать споры бактерий.