Содержание
- Лучшая визуализация
- Идентификация и классификация
- Технико-экономическое обоснование
- Идентификация клеточных структур
Микробиологи изучают характеристики микроорганизмов, таких как водоросли, бактерии, простейшие, грибки и вирусы, с помощью микроскопа. Хотя некоторые организмы, такие как простейшие и дрожжевые клетки, легко увидеть через слайды, бактериальные клетки требуют окрашивания. Ученые разработали ряд методов, таких как метод окрашивания по Граму, кислотно-быстрое окрашивание и флуоресцентное окрашивание для улучшения визуализации бактериальных клеток и клеточных структур. Используя такие методы окрашивания, можно определить структурные характеристики, которые помогают классифицировать бактерии.
Лучшая визуализация
Бактериальные организмы настолько малы, что большинство из них видны только под микроскопом с увеличением в 1000 раз. Однако простое увеличение не обеспечивает достаточной степени ясности, поэтому бактерии должны быть окрашены перед наблюдением, чтобы обеспечить ясность, необходимую для визуализации.
Идентификация и классификация
Окрашивание бактерий для различения типов бактерий известно как дифференциальное окрашивание. Окрашивание по Граму - это дифференциальное окрашивание, которое различает бактерии в зависимости от содержания клеточной стенки. В этом методе бактериальные клетки реагируют с кристаллическим фиолетовым красителем, превращаясь в фиолетовый. При добавлении агента обесцвечивания некоторые бактериальные клетки теряют цвет, а другие - нет. При добавлении красителя сафранина обесцвеченные клетки приобретают красное окрашивание, а бактериальные клетки, которые не теряют цвет, остаются фиолетовыми. Эритроциты называются грамотрицательными организмами, а те, которые не краснеют, классифицируются как грамположительные организмы. Методика окрашивания по Граму обеспечивает быстрый метод первоначальной идентификации бактерий, участвующих в инфекциях. Аналогично, кислотостойкий процесс окрашивания помогает специфически идентифицировать организмы, принадлежащие к классу бактерий, называемых микобактериями, такими как Mycobacterium tuberculosis.
Технико-экономическое обоснование
В образцах бактериальных культур часто важно обнаруживать присутствие живых бактериальных клеток. Такие методы, как флуоресцентное окрашивание, помогают определить, являются ли культуральные клетки жизнеспособными или нет. Живые бактерии обладают способностью превращать тетразолийхлорид 5-циано-2,3-дитолил (СТС) в краситель, который демонстрирует красную флуоресценцию. Следовательно, когда культуры, окрашенные в СТС, испускают эти флуоресценции, это указывает на присутствие жизнеспособных бактерий. Пропидий йодид - это окрашивание, которое действует только на неживые клетки с поврежденными мембранами и поэтому полезно для выявления мертвых бактериальных клеток.
Идентификация клеточных структур
Окрашивание обеспечивает четкий метод визуализации для различных клеточных структур. Например, метод окрашивания Feulgen позволяет идентифицировать ядро внутри бактериальных клеток, в то время как окрашивание Альберта полезно для визуализации метахроматических гранул. Точно так же метод пропитки серебром позволяет идентифицировать спирохеты. Жгутики легко увидеть, если они окрашены в окраску рю. Малахитовое зеленое окрашивание помогает идентифицировать бактериальные споры.
