Содержание
Исследования микробных культур часто требуют выявления присутствующих в них организмов. Когда небольшая часть культуры вносится на агар, содержащий питательную среду, можно разделить массу бактерий на отдельные колониеобразующие единицы. Каждая из этих единиц развивается в отдельных колониях, которые обладают характеристиками, помогающими идентифицировать организм.
Цель
Микробиологические исследования требуют изучения морфологии конкретных организмов. В некоторых случаях организмы, присутствующие в смешанной культуре, необходимо разделить перед анализом. Таким образом, важно изолировать эти микробные колонии. Бактериальные культуры содержат большое количество клеток в одной капле. Посев за счет истощения на чашке агара их разбавляет, так что одна бактериальная клетка откладывается в определенной области чашки. Некоторые из этих отдельных ячеек разделены между собой несколькими миллиметрами. Каждая из них делится, образуя тысячи новых клеток, в результате чего образуются изолированные колонии.
Принцип
В чашке с агаром содержится среда, богатая питательными веществами, которая стимулирует рост и размножение микроорганизмов. При посеве сточных вод используется метод квадрантной штриховки, при котором вся плита делится на четыре квадранта. По мере того, как вы переходите из одного квадранта в другой, происходит постепенное растворение исходной культуры по всей доступной поверхности. Квадрант, с которого вы начинаете, показывает плотный и незаметный рост микробов, который выглядит как ковер из микроорганизмов, в то время как последний показывает изолированные колонии.
Материалы
Для посева по истощению требуются чашки с питательным агаром, петля для посева, бактериальная культура, дезинфицирующий раствор, такой как 10% лизол, и горелка Бунзена. Вам также понадобится защитное снаряжение, такое как фартук, перчатки и защитные очки. Инокулят для образования растяжек изготавливается из культуры бактерий с помощью петли и царапин на пластинах с питательным агаром. Горелка Бунзена предназначена для поджигания ручки во время прорези. Перед экспериментом очистите поверхность дезинфицирующим раствором.
Метод
Используйте небольшое количество посевного материала для посева в первом квадранте возвратно-поступательными движениями. Подожгите ручку и дайте ей остыть, прикоснувшись к части чашки с агаром, которая не была засеяна. Коснитесь им одного конца только что засеянной области и растяните оттуда до второго квадранта. Подожгите и снова охладите петлю, а во второй области проработайте третий квадрант. Повторите тот же процесс с четвертым квадрантом.
