Содержание
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) - это инструмент, используемый для отделения веществ от смеси. Разделение и идентификация определенных химикатов происходит в основном в хроматографической колонке системы. Для CLAE доступно множество типов столбцов, и каждый используется для определенного типа анализа. Колонка C18 - самая прочная из обычно используемых неполярных. После непрерывного использования в течение длительного периода времени расход растворителя через него уменьшается, а время анализа увеличивается. Другой причиной сокращения времени анализа является то, что в пробах остаются небольшие количества химикатов в материале колонки, что снижает возможность их разделения. Восстановление поверхности может быть выполнено путем обработки материала рядом специальных растворителей, чтобы очистить его от любых оставшихся образцов и оживить поддерживающий материал.
Шаг 1
Снимите колонку C18 с направления потока и поместите ее в противоположном направлении. Возвращение растворителя через него снизит эффект накопления, который происходит с течением времени. Следует проявлять осторожность, чтобы не оставить слишком много материала в конце колонки. Некоторые фабрики используют сетку большего размера наверху, так что, когда поток меняет направление, сетка находится в положении внизу. Этот метод восстановления называется реверсированием потока. Чтобы предотвратить попадание отложений в системный детектор и возможное возникновение препятствий, дайте ему возможность работать без подключенного детектора и направьте поток из колонки на утилизацию.
Шаг 2
Поместите трубку канала для растворителя в ряд растворителей, чтобы элюировать любое соединение, оставшееся в колонке, в противоположном направлении. Эти растворители различаются по своим гидрофильным характеристикам. Варьируя их, вы элюируете соединения столь же разнообразной гидрофильной природы. Последовательно используйте по 50 мл каждого из следующих растворителей: воду (если вы используете буфер), метанол, изопропанол, дихлорметан, гексан, дихлорметан и изопропанол.
Шаг 3
Установите колонку в правильном направлении и заставьте растворитель течь через нее. Перед тем как продолжить, вымойте его минимум 75 мл. Протестируйте его с помощью шаблона, который вы использовали, когда он был новым, и проверьте результаты. Обратите внимание при достижении максимальных точек удержания и общего времени анализа. Степень, в которой эти атрибуты соответствуют первоначальному тесту, когда он был еще новым, будет указывать на степень восстановления столбца. Если результаты неудовлетворительны, замените столбец на новый, а старый выбросьте.
